图1. Van Leewenhoek对心肌组织结构的猜想图
1695年,Van Leeuwenhoek在《Arcana Naturae》中发表其通过最简单的光学显微镜观察到的心脏组织粒子呈悬链状排列,他认为心脏不可能在不断裂的情况下将它们分开1。因此,关于心脏是由离散的、颗粒状的物质或是由细胞组成的理论争论起源于此。
图2. Heidenhain描绘清晰的细胞侧面边界图
在此后较长的时间里,科学家一直尝试使用某种方式将心脏组织拆散。其中包括Renault和Landouzy对心脏组织观察到的细胞间基质软化后肌细胞的分离2。1897年,Hektoen提出了将心肌组织用某种特定的液体溶解3。直到1901年Heidenhain的论文中清楚地分辨出肌膜为细胞侧面边界,以及细胞两端的非连续的横向边界4。
1912年,Burrows观察到源自鸡胚胎心脏的细胞有节律的跳动,这是体外心肌细胞原代培养的第一个实例5。1960年,Harary和Farley首次成功分离幼年大鼠心肌细胞,这是第一个成功分离哺乳动物心肌细胞的报道6。此后的三十年间,研究者们逐步从成年心脏组织和儿童心脏组织中分离出心肌细胞,并进行了电生理、细胞核中DNA和蛋白质含量等指标的检测7-11。
虽然在20世纪末,原代心肌细胞分离进入技术井喷期,但是能够分离出来的人原代心肌细胞的数量和质量仍然有限,只能通过多次实验分离出能够完成少数实验的心肌细胞,大量的心脏研究型实验仍然需要使用动物心肌细胞完成。
图3. 深圳百洋智心人原代心肌细胞分离图
对于人原代心肌细胞的高效分离,在21世纪才真正得到突破。深圳百洋智心医学研究有限公司通过总结技术经验,经过多年的潜心研究,打破技术壁垒,自主研发出能够获得高产量高质量的人原代心肌细胞技术,并研制出系列试剂盒,能够帮助研究者从人心脏组织中高效率的分离出原代心肌细胞。这项技术支持从不同心脏组织部位、不同疾病类型、各年龄阶段的组织中获取人原代心肌细胞。通过分离出的人原代心肌细胞,能够更好的完成心肌细胞电生理检测、基因测序、药物毒性筛选、收缩力与钙瞬变功能等多项研究心血管疾病发病机制及临床评价性指标的科学研究工作。
参考文献:
1.Van Leeuwenhoek A. Arcana Naturae. 1695;1:451-8.
2.Renault, Landouzy. Societe de biologie. 1879;333.
3.Hekton. Am J Med Sci. 1897;555-83.
4.Heidenhain M. Anat Anz. 1901;20:33-78.
5.Burrows MT. Science.1912 Jul 19;36(916):90-2.
6.Harary I, Farley B. Science. 1960 Jun 3;131(3414):1674-5.
7.Jacobson SL. Cell Struct Funct. 1977;2(1):1-9.
8.Powell T et al. Br Med J(Clin Res Ed). 1981 Oct 17;283(6298):1013-5.
9.Harding SE et al. J Pathol. 1989 Nov;159(3):191-6.
10.Donegani E et al. Minerva Cardioangiol. 1990 Apr;38(4):157-64.
11.Selivanova GV et al. Tsitologiia. 1990;32(7):704-11.