师弟,你的成纤维细胞分离培养是不是又出问题啦,细胞活率好像都不是很好呀
是啊!在成纤维细胞分离培养过程中,不仅操作细节繁多,失败率也蹭蹭上涨,真是令人头大!
今天就给大家讲一讲成纤维细胞分离、培养过程中出现的问题和具体的解决办法~
成纤维细胞
人心脏成纤维细胞(Human Cardiac Fibroblasts, HCF)对心肌细胞起结构支持作用,是对心肌损伤反应及心脏结构组成的重要细胞,并能产生旁分泌生长因子[1],负责细胞外基质的合成。在文献报道中,成纤维细胞在心房组织中占24.3%,在心室区占15.5%,其中特有基因可能与心脏重塑相关[2]。
人心脏成纤维细胞的增殖和基质合成对于心肌梗塞、心肌纤维化部位瘢痕[3]形成具有重要作用,常并发心脏肥厚。人心脏成纤维细胞是现代心血管领域医学研究的一个重要模型。人心脏成纤维细胞在心肌纤维化的发生和发展过程中起着关键作用[4]。
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图1 心脏组织成纤维细胞在培养期间的成纤维细胞标志物(绿色)Vimentin 以及细胞增殖标志物(红色)Ki-67 的免疫荧光图。图中数据仅供参考。
成纤维细胞是皮肤真皮中的主要细胞成分[5],细胞呈梭形或扁的星状,细胞和细胞核较大,轮廓清楚,核大而明显[6]。
成纤维细胞既合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白,生成胶原纤维、网状纤维和弹性纤维;也合成和分泌糖胺聚糖和糖蛋白等基质成分[7]。从人皮肤组织中分离得到的成纤维细胞在体内能发挥多种生物学功能,具有广阔应用前景。
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图2 真皮成纤维细胞在培养期间的成纤维细胞标志物(绿色)Vimentin 以及细胞增殖标志物(红色)Ki-67 的免疫荧光图。图中数据仅供参考。
成纤维细胞分离、培养中出现的问题
如何解决上述出现的问题
注意事项
成纤维细胞分离和培养
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参考文献
[1] 刘姗姗,林玮,周剑辉等.成纤维细胞生长因子及其在代谢性疾病中的作用与临床应用研究进展[J].药学进展,2019,43(01):19-28.
[2] Litviňuková, M., Talavera-López, C., Maatz, H. et al. Cells of the adult human heart. Nature 588, 466–472 (2020).
[3]史雨晨,柳景华.成纤维细胞生长因子21与急性心肌梗死的研究进展[J].中华老年心脑血管病杂志,2018,20(11):1213-1214.
[4]Tallquist MD, Molkentin JD. Redefining the identity of cardiac fibroblasts. Nat Rev Cardiol. 2017;14(8):484-491.
[5]王云霞,林福全,许爱娥.成纤维细胞异质性在炎症免疫性皮肤病的作用[J/OL].中国皮肤性病学杂志:1-7[2024-03-20].
[6]王英慧.成纤维细胞的生物学特性及其成骨作用的研究进展[J].大同医学专科学校学报,2006(02):30-32.
[7]孟卫星,喻民族著.干细胞治疗学:武汉理工大学出版社,2002:242
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